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艾滋病病毒灭活检测

艾滋病病毒灭活检测介绍:

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艾滋病病毒灭活检测机构哪家数据比较准确?飞凡检测多年来致力于打造出国内专业的第三方检测公司,也在不断的进行学习,对于检测的项目收费比较合理,成为了上千家企业的选择,同时飞凡检测机构还与多家科研所进行合作,取得了较好的成就。公司对各种病毒检测技术也在不断的提高,其中对HIV病毒灭活检测有专业的技术和设备。


HIV病毒灭活检测方法之悬液定量灭活试验操作程序:

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1))从液氮中取出冻存的MT4 细胞,在 37℃温水中迅速融化,并用细胞维持液洗涤两次后,转种于加有10ml 完全培养基培养瓶中。逐日观察细胞生长情况,在细胞对数生长期时收获细胞用于消毒试验。2)从液氮中取出冻存HIV-1毒种,接种于含10ml细胞悬液(含细胞700 000个/ml~800 000个/ml)培养瓶中。逐日观察病变,待3/4细胞出现病变时,收获病毒。收获时,将培养液取出,尽快离心,并将含病毒的上清液按每管0.5ml分装于无菌离心管(1.5ml)中,冷冻保存于-80℃备用。如不能立即离心,可暂将培养瓶冷冻保存于-20℃,并争取尽快离心分装。

3)取待测消毒剂,用无菌去离子水作1:2、1:4、1:8...系列稀释。视消毒剂的类型和实验目的,确定最高稀释度。为防止污染培养液,必要时在试验前需将消毒剂过滤除菌。

4)取50u l待检消毒剂,与50u l病毒原液混合。在规定温度作用一定时间(根据试验要求确定作用时间和温度),立即加入0.9ml用完全培养基制备的MT4 细胞悬液(400 000个/m1),在37℃,放置40min,以确保残留病毒全部吸附在细胞上。阳性(病毒)对照组试验中,用无菌去离子水代替消毒剂;消毒剂对细胞毒性组试验中,用无菌去离子水代替病毒。

5)取出反应管,立即采取去除残留消毒剂处理。处理可用物理去除法或中和剂法(所用方法需先经试验证明,既可有效去除残留消毒剂,又对细胞和 HIV无杀灭或抑制作用。

6)在96孔培养板上滴定样本中残留的病毒量。先在培养板(96孔)的各孔中,加入100u l用完全培养基制备的MT4 细胞悬液(含细胞400 000个/ml)。同时,用完全培养基对待滴定样本做1:10 系列稀释,然后取100u 1稀释好的样本加入已含MT4 细胞悬液的96孔培养板内。每个稀释度做4孔。

7将按上述程序加液的96孔培养板,放入二氧化碳培养箱中(37℃,5% CO2),逐日在显微镜下观察细胞病变。被感染细胞融合肿胀,出现多核巨细胞。第4 d,在各反应孔内补加50u l新鲜完全培养基。第7d,逐孔观察并记录细胞病变情况。

8)试验重复3 次。


评价规定:

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(1)对测试滴度的HIV,3次灭活试验后均应不再检出,此时的灭活对数值应≥4.00,可判为该消毒剂浓度与作用时间,对HIV污染物消毒的实验室试验合格。

(2)在正常情况下,HIV阳性对照组病毒感染滴度(TCID.o)对数值应在5~7之间。阴性对照组宿主细胞生长良好,并且无HIV 检出。所用浓度的消毒液对宿主细胞生长无不良影响。否则,根据发现的问题,或调整HIV悬液浓度,或选择适宜消毒液浓度,或更换污染试剂和培养基,或改进其他有关条件后,重做试验。


注意事项:

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(1)操作人员应具有较丰富的病毒学实验工作经验,必须绝对遵守BSL3实验室的安全制度。身体状态欠佳,或有伤口时,应暂时停止工作。

(2)有感染可能性的操作,均应在 BSL3实验室的层流负压超净工作台中进行。

(3)一旦发生事故,有病毒感染或污染环境的可能时,切莫惊慌,除立即进行妥善消毒处理外,并应尽快报告实验室和单位领导。

(4)本试验周期较长,在全部过程中应注意防止样本污染。


飞凡检测质检报告流程:


1、 提供产品资料

2、 工程师根据您品资料的产品推荐合适检测项目,并给出报价

3、 确认报价没有问题,然后把样品送到我们实验室

4、 支付检测费用,安排检测

5、检测完成,出具检测报告,邮寄给客户


关于飞凡

ABOUT FEIFAN

飞凡检测致力于打造国内专业的第三方检测服务公司,不断优化整合市场检测资源,飞凡检测与多家科研院所,如上海同济大学,苏州大学,以及国内众多知名的检测公司进行深度合作,共同为国内制造业服务,为中国的制造业开拓海外市场保驾护航,为我们日常生活的健康安全树立标杆;公司目前工程师百余人,95%以上是本科以上学历;我们合作的实验室通过CNAS,CMA(EZ),所出具的任何一张报告都有CNAS,CMA资质,确保出具的每份报告都具有权威的法律效力。

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